二氧化碳培養箱操作使用及日常保養

二氧化碳培養箱為細胞生長(cháng)提供了理想的生長(cháng)環(huán)境，細胞在培養箱中培養數月甚數年，如果培養不當導致細胞死亡可能造成極大的科研成果損失。培養箱本身性能的穩定和可靠性固然重要，另外，正確的使用方法和日常保養對實(shí)驗結果也是關(guān)重要。

今天天美為大家介紹減少實(shí)驗室細胞污染的三種途徑：

1.正確的使用培訓；

2.持續的日常保養；

3.適當的擺放位置。

1.正確的使用培訓。

       實(shí)驗室內往往眾多實(shí)驗人員共用一臺培養箱，難免有人為操作失誤，但會(huì )增大交叉污染的風(fēng)險，因此應對所有實(shí)驗人員進(jìn)行培養箱的使用培訓。

需要注意以下幾點(diǎn)：

設備使用培訓

       使用培養箱前必須著(zhù)個(gè)人防護裝備，按照實(shí)驗室生物安全等級要求實(shí)施實(shí)驗室管理規范、無(wú)菌操作方法、標準操作流程（SOP）。

       如實(shí)驗服袖口需扎進(jìn)手套內，未扎進(jìn)的袖口可能接觸到潔凈的培養基，會(huì )增加交叉污染的風(fēng)險，另外裸露皮膚上的可能潛在的污染源也會(huì )增加交叉污染的風(fēng)險

       手套使用前用70%常用消毒劑消毒；

       培養瓶、培養盤(pán)、培養皿等在放入培養箱前需做好標記；

       從箱子后部依次往前擺放培養基，以免早放置的被過(guò)多干擾。近期需要取出的材料放靠近箱門(mén)處并做好標記；

       帶蓋的長(cháng)頸瓶應遠離箱門(mén)以避免交叉污染；

       避免堆疊太多培養基；

       為避免干擾盡量少開(kāi)箱門(mén)。

人員操作培訓

       建立完善的實(shí)驗室管理規范：

       新進(jìn)實(shí)驗員應建立培訓流程；

       實(shí)驗室內應定期或不間斷進(jìn)行操作培訓；

       做好詳盡的文件記錄，文件記錄不僅單純的記錄實(shí)驗室事件，對設備定期維護、實(shí)驗數據查找都能起到很好的提示和記錄，比如提示每周檢查過(guò)濾器、開(kāi)門(mén)頻率對細

胞生長(cháng)的影響。

2.持續的日常維護保養

       培養箱日常維護保養對其性能的保障非常重要，甚比操作技術(shù)失誤對實(shí)驗結果的影響更大。做好培養箱的日常維護不僅減少對實(shí)驗結果的影響更能延長(cháng)培養箱的使用壽命，降低實(shí)驗室成本。

完善的文件管理

       廠(chǎng)商提供的操作維護說(shuō)明書(shū)是很好的參考文件，會(huì )列舉日常使用及保養需注意的要點(diǎn)，可以作為實(shí)驗室培養箱維護文件的參考。制定維護保養文件時(shí)需全面考慮培養箱使用頻率、實(shí)驗室環(huán)境潔凈度、使用人員的數量、以及培養細胞的類(lèi)型等，綜合各方面情況列出合理的方案。

箱體的定期清潔

       培養箱內外部的定期清潔頻率取決于培養細胞的類(lèi)型和實(shí)驗室環(huán)境。

       外部清潔必須定期去除灰塵及長(cháng)期附著(zhù)在表面的污染物，這些污染物在開(kāi)門(mén)時(shí)很可能隨空氣流動(dòng)潛入箱體內。培養量大的實(shí)驗室建議每周清潔一次，培養量小的實(shí)驗室建議每月清潔一次。使用較溫和的家用清潔劑或蒸餾水清潔即可。

       不銹鋼內膽建議每月清潔一到兩次，圓角的設計（圖D）可以減少污染物的產(chǎn)生，可使用70%異丙醇、酒精或其它無(wú)腐蝕性的消毒劑擦拭，切記不可使用鹵素類(lèi)消毒劑（次氯酸、漂白 粉）。門(mén)口墊圈處（圖E）很易滋生污染物，需注意加強清潔，或拆下進(jìn)行高溫滅菌。

水盤(pán)的清潔

       水盤(pán)的清潔和換水是培養箱日常維護很重要的項目，少一周需清潔一次，頻繁加水以保障飽和濕度。水盤(pán)加水使用蒸餾水或去離子水，可以加少劑量的硫酸銅溶液

抑制污染物。

防止干燥

       如果培養環(huán)境濕度不足，培養基中的水分會(huì )蒸發(fā)造成環(huán)境干燥影響細胞生長(cháng)。少每周加一次水對保持培養箱濕度非常重要。

污染風(fēng)險降到 低

       細菌、霉菌、病毒或支原體污染是細胞生長(cháng)大的威脅?，F代的培養箱的設計和特點(diǎn)可以適當減少污染發(fā)生。

HEPA過(guò)濾器

       閉環(huán)HEPA過(guò)濾器是減少污染發(fā)生的一個(gè)重要設計。HEPA過(guò)濾器持續提供箱內潔凈的空氣。但為保證HEPA過(guò)濾的有效性，HEPA需要定期更換，每周或每?jì)芍軕ㄆ跈z查過(guò)濾器。進(jìn)氣過(guò)濾器（圖F）的壽命一般在3-6個(gè)月。NuAire建議供氣過(guò)濾器（圖G）每使用5瓶氣或已變黃時(shí)更換一次，大的囊性過(guò)濾器（圖H）每?jì)赡晷韪鼡Q一次。

       配備HEPA過(guò)濾器的培養箱類(lèi)似一個(gè)微型潔凈間，箱內持續過(guò)濾的空氣使箱體空氣潔凈度達到百級。每一次開(kāi)箱門(mén)都可能造成污染物的侵襲，NuAire培養箱每20分鐘換氣一次，使污染物快速被過(guò)濾，箱體內空氣潔凈度達ISO 5級。

循環(huán)滅菌

       一些實(shí)驗室潛在病原微生物如HIV病毒，需要145℃干熱循環(huán)滅菌才能有效滅殺。145℃滅菌程序需要持續8-14小時(shí)，可選擇在夜間運行。NuAire培養箱*的層架和內部五金件耐受145℃滅菌，無(wú)需滅菌前取出，節約了滅菌時(shí)間。

      145℃滅菌需要按照實(shí)驗室SOP根據實(shí)際需要運行，并且不能代替日常的清潔保養。

3.放置適當位置

       培養箱需要放置在實(shí)驗室內合適的位置：遠離走廊，環(huán)境溫度需穩定，遠離水源，遠離通氣設備以免空氣污染，遠離窗口避免陽(yáng)光直射，遠離其它熱源如高壓蒸汽滅菌器，以及離電源近的位置。